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膠原蛋白9007-34-5標準品的提取方法有哪些?

2018-07-25 16:23 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
     膠原蛋白是生物高分子,動物結(jié)締組織中的主要成分,也是哺乳動物體內(nèi)含量最多、分布最廣的功能性蛋白,占蛋白質(zhì)總量的25%~30%,某些生物體甚至高達80%以上。那么,我們應該如何提取膠原蛋白呢?
     提取膠原蛋白的大概過程是去除油脂,去除雜蛋白,膠原蛋白析出,純化等。它的提取方法有以下幾種:熱水提取法,酸提取法,堿提取和酶提取法。下面就由小編為您詳細講解一下提取膠原蛋白的方法吧!

1.熱水提取法
     熱水提取法是將原料經(jīng)過除雜蛋白等前處理之后,直接在熱水中提取已經(jīng)變性了的膠原蛋白或膠原蛋白水解物的方法,使用的溫度有100℃沸水浴、60-70℃、40-42℃、45℃。
2.酸提取法
     酸提取法常用的酸有:甲酸、乙酸、鹽酸、草酸、檸檬酸、乳酸等。低離子濃度酸可以破壞分子間鹽鍵和希夫氏堿,引起膠原纖維膨脹、溶解。
使用酸提取膠原時,根據(jù)酸濃度、水解溫度、水解時間等條件的不同,可以得到分子量不均的膠原水解物。但是在等濃度酸徹底水解過程中色氨酸會全部被破壞,絲氨酸和酪氨酸也會部分被破壞。因此,酸法溶出生物醫(yī)用膠原要準確控制酸度、溫度、時間等影響因素。
3.堿提取法
     堿提取通常使用氫氧化鈉,碳酸鈉等,堿性條件下提取膠原,易引起蛋白質(zhì)變性,如膠原肽鍵水解,含羥基、疏基的氨基酸全部被破壞;所得產(chǎn)物等電點pH值較低,天冬酞胺和谷氨酞胺分別轉(zhuǎn)變?yōu)樘於彼岷凸劝彼幔蝗绻鈬乐兀瑒t會產(chǎn)生D、L型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高過L 型氨基酸,則會抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,有的甚至有致癌、致畸和致突變的作用。因此,在提取結(jié)構(gòu)完整、使用安全的膠原時,很少采用堿法提取膠原。
4.酶提取法
     用蛋白酶處理豬皮,不僅可以水解掉膠原纖維蛋白的末端肽,提高膠原蛋白的產(chǎn)率;而且還不會破壞膠原蛋白的三股螺旋結(jié)構(gòu),保持其優(yōu)良的物理和生化特性。通常使用的蛋白酶主要有中性蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶等。影響酶提取的因素有很多,如酶濃度、酶與底物的比例、酶解時間、酶解溫度、pH值以及料液比等。在實際操作中,大多數(shù)采用酶復合法提取膠原蛋白。
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