GenGreen核酸染料特點和安全性測試
2020-05-14 10:59 作者:洛辰 來源:上海遠(yuǎn)慕生物試劑
在電泳實驗或其他核酸分離實驗中,常用EB來識別和顯示核酸條帶。EB被紫外線照射時能發(fā)出紅褐色的熒光。盡管EB是一種高效的顯色劑,但它的高危險性要求特殊的安全管理和回收流程。
EB是一種強(qiáng)誘變劑(可能造成遺傳性危害),直接接觸有中等毒性。EB可以通過皮膚吸收,因此應(yīng)當(dāng)避免一切與EB的直接接觸。
致力于凝膠電泳實驗的安全性,我公司*新研發(fā)的核酸熒光染料—GenGreen和藍(lán)光切膠儀,解決了電泳實驗染料毒性和紫外線對人體和核酸的傷害困擾。
GenGreen染料使用過程簡單,穩(wěn)定性好,同時因為其跑膠帶型好,靈敏度高,背景低,而深受廣大用戶喜愛。
GenGreen核酸染料特點:
1.安全無毒
獨特的油性和大分子特點,使其熱穩(wěn)定性好,不易揮發(fā),不能穿透細(xì)胞膜,安全無毒。是新一代替代EB的*佳核酸熒光染料。
2.與藍(lán)色可見光激發(fā)裝置完美結(jié)合
藍(lán)光切膠,雙重安全。GenGreen核酸染料既適用于 254 nm紫外凝膠成像系統(tǒng)(與EB相同光譜特性),又與藍(lán)色可見光激發(fā)裝置完美結(jié)合,使用藍(lán)光切膠儀切膠,既避免了紫外切膠對操作人員眼睛和皮膚造成的傷害,又避免了紫外對核酸產(chǎn)物的損傷。
3.高靈敏度,低背景
GenGreen核酸染料熒光信號強(qiáng),背景信號低,具有高信噪比,在紫外成像下靈敏度與EB相當(dāng),但在藍(lán)光下靈敏度比EB更高,使用也更加靈活方便。
4.穩(wěn)定性極好
適用于微波或其他方法加熱,可以在室溫下保存。
5.廣泛的適應(yīng)性
適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色,可用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳; dsDNA、ssDNA或
RNA染色。
6.操作簡單:使用方法同EB
GenGreen激發(fā)光譜
Ex(nm):254 Em(nm):504
GenGreen核酸染料是為了攻克核酸染料毒性問題,而研發(fā)設(shè)計的一款油性及大分子物質(zhì),因為它的這種特性使其難以穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),正是這一特性降低了染料的細(xì)胞毒性。
相反, 由于SYBR Green I 能快速的被細(xì)胞吞入,而廣泛地用于活細(xì)胞線粒體和核 DNA 染色。已知 SYBR Green I 對紫外線導(dǎo)致的突變有強(qiáng)烈的增強(qiáng)作用( Ohta et al. Mutat. Res. 492 , 91(2001) ),SYBRGreenI 其高細(xì)胞膜透性,使它成為凝膠染色的有害物質(zhì)。
分別用SYBR GreenI、GenGreen做細(xì)胞毒性試驗測試。
目的:通過試驗測試GenGreen是否能夠穿透活細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)。
一:安全性測試
(A)5min
GenGreen SYBR Green I
(B)30min
GenGreen SYBR Green I
在37°C下,分別使用1× SYBR Green I, GenGreen 對HeLa 細(xì)胞進(jìn)行孵化,并分別在5分鐘(A)和30分鐘(B)后觀察。實驗顯示SYBR Green I染料迅速進(jìn)入細(xì)胞并將細(xì)胞內(nèi)的核酸染成亮綠色,而GenGreen 則因為不能穿透細(xì)胞膜而完全沒有進(jìn)入細(xì)胞內(nèi), 足以證明GenGreen是安全的。
結(jié)論:GenGreen因為不能穿透細(xì)胞膜而完全沒有進(jìn)入細(xì)胞(Hela細(xì)胞)內(nèi), 證明GenGreen是安全的。