關于預染蛋白marker你知道多少？
2019-10-08 11:33 作者：洛辰 來源：上海遠慕生物試劑
什么是預染蛋白marker，關于預染蛋白marker你知道多少？
蛋白marker可分為未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準以及預染的Marker即單色預染和多色預染。那么，什么是預染蛋白marker？預染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍色染料共價偶聯.可在凝膠電泳時出現強度均勻的8條帶.同未預染的蛋白marker相比,預染蛋白marker因與染料共價偶聯而在SDS-PAGE電泳時的遷移特性發生某些改變.
預染蛋白分子量標準
預染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物，通過與染料共價耦聯，在電泳過程中或者轉膜時可以直接觀察到。預染蛋白分子量的出現方便了我們的實驗，這種蛋白分子量標準可以幫助我們在電泳時、電泳后，以及轉膜后監測電泳情況和估計遷移率——比如，已知垂直電泳最佳分辨區域大約在膠的2/3處，如果使用預染蛋白Marker就可以預測目標蛋白進入最佳分辨區時停止電泳以得到最佳分辨效果;如果觀察到Marker電泳異常也可以及時終止電泳;另外在Western Blot轉膜以后可以直接觀察蛋白轉膜是否完全，還可以在膜上標記蛋白分子量，所以吸引了許多實驗室人員購買預染蛋白標準。值得注意的是預染蛋白Marker與染料共價耦聯，所以在不同的緩沖條件下電泳時遷移特性可能會發生某些變化，可能導致一些偏差，所以不太適合精確定位蛋白——不過多數情況下Marker的條帶未必能和我們的目標蛋白完全一樣，我們得到的也不過是一種相對Marker指示的參考大小，最后都需要Western來定性，所以如果不是要區分大小相近的條帶，預染Marker還是很好用的，而且也可以和未染色的蛋白標準一起使用。
預染蛋白標準可以分為兩種：單色預染和多色預染，其實區別就在于幫助在實驗過程中辨認某個條帶的大小——Marker條帶越多參考價值越大，可就越難辨認區分，如果用不同的顏色來區別就比較好辨認啦。如果沉悶的電泳實驗中跑出五顏六色的彩虹Marker，此時心情想必會愉快一些!單色的Marker通常是利用其中某些條帶加倍濃度來提示其大小的。還有一點特別要注意，由于轉膜是一個將膠里的Marker濃縮在潔白的膜上，所以需要的上樣量相對少一些，如果想要在電泳過程中看到美麗的“彩虹”，或者單色的Marker往往需要比說明書里多加一些Marker的。
非預染蛋白marker和預染蛋白marker有什么區別
簡單講，就是非預染蛋白marker電泳時看不到條帶，染色后才能看到，而預染蛋白marker會有特定的某些蛋白條帶帶有顏色，電泳過程中可以觀察到，還有在WB過程中也起到轉膜是否成功的指示作用
預染的marker的分子量在不同濃度膠上跑出來是不一樣的，這個叫表觀分子量。未預染的marker是最準確的，如果只做wb，預染的marker就夠了，每次都能觀察轉膜情況。
其他都是些細節上的區別，比如有些預染蛋白marker會做成彩虹色的，以便區別分子量大小有些預染蛋白marker的條帶比較多等等
![雙[三(羥甲基)氨基甲烷],CAS:6976-37-0](http://struc.chem960.com/strucimg/7000/ctzw0nzi34oyob9fnlmhiwee.png)
