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遠慕生物講述:動物血清的鑒別方式

2017-11-14 15:27 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
上海遠慕生物技術人員詳細為您講述動物血清的鑒別方式,相關用途,特點,保存方法等咨訊!
我們都知道細胞培養的過程中需要用到培養基,有些培養基需要用合成培養基加上動物血清,有些細胞只有加了血清才能正常分裂,所以動物血清也是科研人員經常使用到的一種產品,但對于動物血清的鑒別方式,保存方法,用途等還是了解甚少,我們該如何去鑒別呢?下面由上海遠慕生物技術人員就這個問題為大家進行詳細的解說分析!



動物血清鑒別方式

 血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應被激活,血液迅速凝固,形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿最大的區別。

 而在凝血反應中,釋放出許多物質,各凝血因子也都發生了變化。這些成分都留在血清中并繼續發生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區別之處。但大量未參加凝血反應的物質則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。



動物血清保存方法

 

1、長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。


2、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清。


3、血清解凍: 瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生。切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀。


4、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多。


動物血清用途

1、提供基本營養物質:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。

2、提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素、類固醇激素。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。

3、提供結合蛋白:結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。

4、提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。

5、對培養中的細胞起到某些保護作用:有一些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。 

 

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