本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫學診斷
    人組胺（HIS）ELISA檢測試劑盒使用說明書

    檢測原理
    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被組胺（HIS）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的組胺（HIS）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

    樣品收集、處理及保存方法
    1. 血清：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
    3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
    5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    自備物品
    .酶標儀（450nm）
    .高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    .37℃恒溫箱

    操作注意事項
    .  試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正常現象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
    .  實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
    .  濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，最終結果乘以5才是樣本實際濃度。
    .  嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
    .  所有液體組分使用前充分搖勻。

    試劑的準備
    20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

    洗板方法
    .  手工洗板：甩盡孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
    .  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

    操作步驟
    .  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
    .  設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
    .  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
    .  除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
    .  棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
    .  每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
    .  每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結果判斷
    繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

    試劑盒性能
    . 準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
    . 靈敏度：最低檢測濃度小于0.1ng/mL。
    . 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
    . 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
    . 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
    . 有效期：6個月

    免責聲明
    .  試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
    .  嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。