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物質的熒光強度與這些因素有關

2025-02-17 10:34 作者:洛辰 來源:上海遠慕生物試劑
溫度增加,熒光強度下降(因為內、外轉換增加、粘度或“剛性”降低)。因此體系降低溫度可增加熒光分析靈敏度。
影響熒光及強度的因素

1)躍遷類型:通常,具有π—π*及n—π*躍遷結構的分子才會產生熒光。而且具π—π*躍遷的量子效率比n—π*躍遷的要大得多(前者大、壽命短、kisc小)。

2)共軛效應:共軛度越大,熒光越強。

3)剛性結構:分子剛性(rigidity)越強,分子振動少,與其它分子碰撞失活的機率下降,熒光量子效率提高。如熒光素(φ大)與酚酞(φ=0);芴(φ=1)與聯苯(φ=0.18)。

4)取代基:①給電子取代基增強熒光(p-π共軛),如-oh、-or、-nh2、-cn、nr2等;②吸電子基降低熒光,如-cooh、-c=o、-no2、-no、-x等;③重原子降低熒光但增強磷光,如苯環被鹵素取代,從氟苯到碘苯,熒光逐漸減弱到消失,該現象也稱重原子效應。

5)溶劑效應:①溶劑極性可增加或降低熒光強度(改變π—π*及n—π*躍遷的能量);②與溶劑作用從而改變熒光物質結構來增加或降低熒光強度。

6)溫度:溫度增加,熒光強度下降(因為內、外轉換增加、粘度或“剛性”降低)。因此體系降低溫度可增加熒光分析靈敏度。

7)ph值:具酸或堿性基團的有機物質,在不同ph值時,其結構可能發生變化,因而熒光強度將發生改變;對無機熒光物質,因ph值會影響其穩定性,因而也可使其熒光強度發生改變。

8)內濾光和自吸:體系內存在可以吸收熒光的物質,或熒光物質的熒光短波長與激發光長波長有重疊,均可使熒光強度下降,稱為內濾光;當熒光物質濃度較大時,可吸收自身的熒光發射,稱為熒光自吸。

9)熒光猝滅:①碰撞猝滅;②靜態猝滅;③轉入三重態的猝滅;④電子轉移猝滅;⑤自猝滅。
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